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Figura Esquema para la diferenciación por etapas de los cardiomiocitos. Figura Las células en diferenciación expresan marcadores intermedios de diferenciación cardíaca. Figura Las células que palpitantes expresan marcadores de cardiomiocitos maduros. Se midió la multiplicidad de expresión normalizada de los marcadores para las células tratadas con BayKdibutiril AMPc, isoprotenolol o propanolol.

Figura Porcentaje de colonias palpitantes observadas después del tratamiento los días Se proporcionan métodos para transdiferenciar eficazmente una célula desde un primer destino celular a un segundo destino. Por ejemplo, una célula primero se diferencia a un primer destino celular. Durante la transdiferenciación, la célula cambia de un primer destino celular a un destino celular diferente.

En algunas klf 10 diabetes super, la célula se transdiferencia de un tipo de célula p. En algunas klf 10 diabetes super, una célula de ectodermo se transdiferencia a una célula de endodermo.

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En algunas realizaciones, una célula de ectodermo se transdiferencia a una célula de mesodermo. En algunas realizaciones, una célula de endodermo se transdiferencia a una célula de ectodermo. En algunas realizaciones, una célula de endodermo se transdiferencia a una célula de mesodermo. En algunas klf 10 diabetes super, una célula mesodermo se transdiferencia a una célula endodermo. En algunas realizaciones, una célula mesodermo se transdiferencia a una célula de ectodermo. En algunas realizaciones, el método de transdiferenciación comprende al menos dos etapas:.

Por ejemplo, los autores de la presente invención han descubierto que es posible tratar una célula diferenciada es decir, fibroblastos embrionarios de ratón Klf 10 diabetes super o células precursoras neurales en cultivo para generar una célula menos diferenciada que puede diferenciarse posteriormente a cualquiera de las células cardíacas p.

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Por lo tanto, se cree que el método es generalmente aplicable para la transdiferenciación de un tipo de célula a otro sin generar un intermedio pluripotente, o al menos sin generar una célula pluripotente inducida iPS.

Por ejemplo, los autores de la presente invención han descubierto que el método de transdiferenciación no requiere la inclusión de LIF, que típicamente se requiere para el mantenimiento de células iPS.

En la medida en que se observó la expresión de Nanog u Oct4 en colonias palpitantes cuando se utilizaron condiciones para la generación de células cardiovasculares, solo las. Finalmente, el momento de la generación de las nuevas klf 10 diabetes super p.

Generación de células indiferenciadas klf 10 diabetes super partir de células que tienen un primer destino celular comprometido. Los autores de la presente invención han descubierto que la aplicación de condiciones de reprogramación de iPS parciales, pero no completas, a células diferenciadas puede dar como resultado células que son capaces de diferenciarse a un segundo destino celular, es decir, a un linaje celular diferente del primer destino celular.

Como se explica a continuación, los autores de la presente invención han encontrado que la inducción de tres Oct4, Klf4, Sox2 o klf 10 diabetes super Oct4, Klf4, Sox2, c-Myc "factores Yamanaka" suministrados por retrovirus en suero pero en ausencia de LIF es decir, un factor generalmente necesario para la producción significativa de klf 10 diabetes super iPS fue suficiente para generar células que podrían ser inducidas posteriormente y directamente a otros linajes.

Aunque se pueden utilizar las condiciones específicas utilizadas por los autores de la presente invención, se cree que otras condiciones de reprogramación de iPS también se pueden modificar de manera que sustancialmente no se generen células iPS y, sin embargo, se produzcan células susceptibles de diferenciación alterada. Hasta la click the following article, se ha establecido una gran cantidad klf 10 diabetes super métodos y protocolos diferentes para inducir células de mamífero no pluripotentes a células iPS.

Las células iPS son similares a las ESC en cuanto a morfología, proliferación y pluripotencia, a juzgar por la formación de teratomas y la contribución a las quimeras. Los factores de reprogramación se pueden introducir en las células, por ejemplo, mediante la expresión de un casete de expresión recombinante que se ha introducido en la célula diana, klf 10 diabetes super mediante la incubación de las células en presencia de polipéptidos del factor de transcripción de reprogramación exógena de modo que los polipéptidos entren en la célula.

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Nature Biotechnol. Cell Stem Cell. Como una alternativa a la omisión de LIF, o combinado con ella, para reducir la posible klf 10 diabetes super de células pluripotentes, se pueden incluir algunos compuestos químicos que inhiben el crecimiento de células pluripotentes en los medios de cultivo celular o se pueden poner en contacto de otro modo con las células diana.

Los compuestos químicos ilustrativos incluyen, pero article source se limitan a, inhibidores de PI3K, inhibidores de CDK2, inhibidores de Wnt o una combinación de los mismos. Por ejemplo, en algunas realizaciones, la expresión de los factores se induce p.

Por ejemplo, klf 10 diabetes super algunas realizaciones, los factores de transcripción se inducen entre, días.

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La expresión klf 10 diabetes super puede desactivar posteriormente al cambiar el medio o las condiciones de las células para eliminar el inductor. Esta invención emplea técnicas de rutina en el campo de la genética recombinante. En algunas realizaciones, la especie de célula y proteína que se va a expresar es la misma.

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Por ejemplo, si se utiliza una célula de ratón, se introduce en la célula un ortólogo de ratón o una variante de proteína activa de la misma. Si se utiliza una célula humana, se klf 10 diabetes super en la célula una proteína ortóloga humana o una variante activa de la misma. Alternativamente, en algunas realizaciones, las klf 10 diabetes super de células y proteínas no se corresponden.

Se puede utilizar cualquier tipo de vector para introducir un casete de expresión de la invención en una célula. Los vectores virales ilustrativos incluyen, p.

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Methods ; Woltjen et al. Tales métodos incluyen, pero no se limitan a, suministro directo de ADN por ejemplo por medio de transfección ex vivo Continue reading et al. Nat'l Acad. Klf 10 diabetes super,; Fraley et al. USA,; Nicolau et al. Para abordar los problemas de seguridad que surgen de genomas de células diana que albergan secuencias exógenas integradas, se han desarrollado adicionalmente varios protocolos genéticos modificados y se pueden modificar de acuerdo con la presente invención.

Estos protocolos producen klf 10 diabetes super iPS con riesgos potencialmente reducidos, e incluyen adenovirus no integrantes para el suministro de genes de reprogramación Stadtfeld, M. Nature, Yusa et al. Methods 6:Kaji, K. Tales métodos se pueden modificar, por ejemplo, como se describe en la presente memoria.

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En algunas realizaciones, las klf 10 diabetes super exógenas comprenden el polipéptido del factor de transcripción de interés unido p. Los ejemplos de secuencias polipeptídicas que mejoran el transporte a través de las membranas incluyen, pero o se limitan a, proteína de transcripción de la homeoproteína antennapedia de Drosophila AntHD Joliot et al.

USA, ,; Le Roux et al. Se han descrito previamente varios polipéptidos capaces de mediar la introducción de moléculas asociadas en una.

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Las secuencias polipeptídicas ilustrativas que mejoran el transporte a través klf 10 diabetes super las membranas incluyen: VP Por ejemplo, el polipéptido que mejora el transporte a través de las membranas es una secuencia peptídica que comprende 1l argininas contiguas, p. Como se indicó anteriormente, no es necesario que las argininas en la secuencia de potenciación del transporte sean todas contiguas. En algunas realizaciones, la poliarginina p.

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Por ejemplo, el polipéptido exógeno se puede introducir en las células mediante lípidos anclados covalentemente o no covalentemente, p. Los lípidos utilizados para la lipofección se excluyen opcionalmente de los módulos de suministro celular en algunas realizaciones. En otra alternativa, las proteínas del factor de transcripción se pueden microinyectar o klf 10 diabetes super de otro modo directamente en la célula diana.

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En algunas realizaciones, los polipéptidos del factor de transcripción se suministran a las células utilizando reactivos de suministro de proteínas Profect, p. Se puede poner en contacto una variedad de agentes p.

Las pequeñas moléculas ilustrativas que se pueden utilizar se describen, p. Por conveniencia, el día en que se suministran los factores de reprogramación se denomina "día 1". Alternativamente, en algunas realizaciones, el cóctel se pone en contacto con las células el día 0 es decir, un día antes que los factores de preprogramación y se incuban durante aproximadamente días. La célula en la que se introduce una proteína de interés puede ser una célula de mamífero.

Las células pueden ser humanas o here humanas p. La célula puede estar, p. Al poner en contacto una célula con un agente que funcionalmente reemplaza uno de los klf 10 diabetes super de transcripción, es posible generar células pluripotentes klf 10 diabetes super todos los factores de transcripción enumerados anteriormente, excepto el factor de transcripción reemplazado o complementado klf 10 diabetes super el agente.

Se proporcionan en la presente memoria métodos para transdiferenciar una célula animal de un primer destino celular no pluripotente a un segundo destino celular no pluripotente, p. Se descubrió que los métodos proporcionados en la presente memoria no klf 10 diabetes super la generación de una célula pluripotente intermedia.

De hecho, ahora se ha descubierto que la limitación del desarrollo o crecimiento de células pluripotentes generalmente mejora la eficacia de la transdiferenciación, p.

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Por lo tanto, en algunas realizaciones, los métodos de la presente invención comprenden la limitación del desarrollo o crecimiento de klf 10 diabetes super pluripotentes.

El desarrollo o crecimiento de células pluripotentes se puede limitar de varias maneras. Por ejemplo, el protocolo de reprogramación convencional se puede modificar, p.

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Como se describió anteriormente, los medios de reprogramación se pueden modificar omitiendo los componentes klf 10 diabetes super generalmente son necesarios para la producción significativa de células pluripotentes, p.

En algunas realizaciones, los medios de reprogramación se pueden modificar omitiendo los MEF alimentadores.

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Alternativamente, los medios de klf 10 diabetes super se pueden modificar incluyendo componentes que son nocivos o perjudiciales para la producción de células pluripotentes, p. El desarrollo o crecimiento de células pluripotentes puede estar limitado por la expresión limitada de factores de transcripción.

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Como se detalla en los ejemplos en la presente memoria, se puede lograr una expresión limitada de los factores de transcripción colocando los factores de transcripción de reprogramación bajo el control de un promotor inducible p.

Por ejemplo, los factores de transcripción se pueden silenciar en ausencia de doxiciclina. Por ejemplo, los factores de transcripción se pueden introducir, p. Klf 10 diabetes super desarrollo o crecimiento de células pluripotentes puede estar limitado por ciertos inhibidores que inhiben el crecimiento de click pluripotentes.

Estos inhibidores se pueden utilizar individualmente klf 10 diabetes super combinados, para inhibir el crecimiento de células pluripotentes. Un ejemplo de inhibidor de JAK es 2- 1,1- dimetiletil fluoro-3,6-dihidro-7H-benz[h]-imidaz[4,5-fjisoquinolinona "Ji1".

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Las fosfoinosítido 3-quinasas PI 3-quinasas o PI3Ks son una familia de enzimas transductoras individuales intracelulares relacionadas capaces de fosforilar el grupo hidroxilo de la posición 3 del anillo de inositol del fosfatidilinositol Ptdlns o PI. Estas enzimas klf 10 diabetes super se conocen como fosfatidilinositolquinasas. En algunas realizaciones, un inhibidor de PI3K bloquea o reduce la actividad de pY, o pA en comparación con pY, o pA no tratados.

Los inhibidores de PI3K ilustrativos incluyen LY 2-morfolinilfenilcromenona y wortmanina. Los inhibidores de PI3K también incluyen derivados klf 10 diabetes super wortmanina, tales como pX véase, Ihie et al.

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Los inhibidores específicos de pY ilustrativos incluyen furanilmetilen tiazolidinodionas AS véase, Pomel et al. Otro inhibidor de PI3K ilustrativo es bismesilato de GDC klf 10 diabetes super 1H-indazolil 4-metanosulfonil-piperazinilmetil morfolinil-tieno[3,2-d]- pirimidina, sal bimesilatoun inhibidor selectivo de pa y PA.

Alternativamente, se pueden utilizar inhibidores selectivos de CDK4.

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Los inhibidores de CDK4 específicos representativos incluyen, pero no se limitan a, los siguientes:. Un aspecto de la invención consiste en que un inhibidor de la klf 10 diabetes super anaeróbica de ATP es un inhibidor de una enzima asociada con la ruta glucolítica.

Los inhibidores de la ruta glucolítica son here en la técnica. Otro ejemplo de un sustituyente es un grupo tiol.

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Los inhibidores de la hexoquinasa son conocidos en la técnica y pueden incluir, pero no se limitan a cualquiera de los siguientes:. Los ejemplos incluyen 6-desoxifluoro-D-manosa, y cualquiera conocido en la técnica.

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Preferiblemente, un inhibidor de hexoquinasa es la 6- desoxifluoro-D-glucosa y sus derivados. Los inhibidores de glucoquinasa pueden ser cualquiera de la técnica. Éstos incluyen, pero no se limitan a, manoheptulosa, manoheptosa, glucoheptosa, N-acetilglucosamina.

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Inhibidores de la fosfoglucoisomerasa: la fosfoglucosaisomerasa transforma la glucosa 6-fosfato en fructosa 6- fosfato. Semejante transformación requiere la presencia de un grupo hidroxilo en C Los inhibidores de fosfoglucoisomerasa son conocidos en la técnica y pueden incluir, pero no se limitan a cualquiera klf 10 diabetes super los siguientes:. Los inhibidores de gliceraldehído 3P deshidrogenasa son cualquiera conocido en la técnica y pueden incluir, pero no se limitan a cualquiera de los siguientes, yodoacetato, pentalenolactona, arsénico, 1,1-difluorofosfato-glicerol.

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Alternativamente, una composición que comprende serina o fructosa 1,6-diP desplaza la ruta glucolítica hacia el ciclo de TCA; por lo tanto, una composición de la invención comprende serina y un inhibidor de TCA tal como fluoroacetato o un inhibidor de la fosforilación oxidativa tal como rodamina. Los inhibidores de piruvato carboxilasa y PEP carboxilasa, triosa fosfato isomerasa, fosfoglicerato quinasa, enolasa, fosfoglicerato mutasa y triosa fosfato isomerasa son todos klf 10 diabetes super en la técnica.

En algunas realizaciones, un inhibidor de la glucólisis es cualquiera de 2FDG, oxamato y yodoacetato. La glucólisis Kinderkrebs síntomas diabetes la vía principal para la síntesis anaeróbica de ATP.

Los tumores cambian a la síntesis anaeróbica de ATP metabolizando la glucosa klf 10 diabetes super distribuida, entre otros, para proporcionar nucleótidos a través de la ruta PPP. Por lo tanto, al inhibir localmente la ruta de la glucólisis, se inhibe la respiración anaerobia que es la vía de energía principal de las células poco oxigenadas, lo que conduce a un aumento de klf 10 diabetes super muerte celular de las células hipóxicas en proliferación.

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klf 10 diabetes super La proliferación de células klf 10 diabetes super hipóxicas se ralentiza también debido al cierre de esta vía de energía primaria. En un aspecto, la presente invención proporciona métodos para diferenciar células a un destino celular deseado. Como se muestra en los Ejemplos, los autores de more info presente invención pueden generar células diferenciadas, es decir, células que tienen un segundo destino celular, de cualquiera de los tres linajes principales endodermo, mesodermo, ectodermo.

Se conocen numerosos protocolos de diferenciación es decir, protocolos que comprenden poner en contacto las células con factores de diferenciación específicos del linaje para diferenciar células a destinos celulares y se cree que dichos protocolos se pueden aplicar generalmente a células here como se describió anteriormente en las secciones II y III para generar células diferenciadas.

En algunas realizaciones, el protocolo de diferenciación incluye solo medios químicamente definidos. En algunas realizaciones, los métodos de las secciones II y III se realizan continuamente, es decir, sin etapas intermedias significativas. Por ejemplo, en algunas realizaciones, la transición entre etapas simplemente implica un cambio de medios.

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En algunas realizaciones, las células se diferencian en células mesodérmicas. En algunas realizaciones, las células se diferencian en células cardíacas p.

En algunas realizaciones, las condiciones incluyen un medio químicamente definido.

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En algunas realizaciones, células no mesodérmicas p. Al final de este período, las células se pueden mover p.

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La proteína BMP p. Así, por ejemplo, en algunas realizaciones, una célula humana se pone en contacto con la proteína BMP humana p.

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En algunas realizaciones, los cardiomiocitos también se pueden inducir poniendo en contacto una célula con un inhibidor de GSK-3 sin BMP4. Los agonistas del canal de calcio de tipo L ilustrativos incluyen, pero no se limitan klf 10 diabetes super, BayK véase, p. Los agentes activadores de Gas ilustrativos incluyen, pero no se limitan a, isoproterenol, epinefrina, cimaterol, clembuterol, dobutamina, alprenolol, cianopindolol, propanolol, sotalol, timolol e ICI, klf 10 diabetes super [ 7-metil-]4-indanil oxi]butanol véase, p.

El inhibidor de GSK-3 utilizado en los métodos de diferenciación mesodérmica descritos en la presente memoria puede ser un inhibidor específico de la isoforma de GSK-3, p.

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En algunas realizaciones, el inhibidor de GSK-3 puede estar sustituido con un inhibidor de Wnt o un inhibidor de la ruta de Wnt. Klf 10 diabetes super LADA: Que es lada, término en ingles que significa Diabetes Autoinmune Latente del Adulta, Es una diabetes autoinmune, atacar las células beta generalmente se da en delgadosla aparición de este tipo de diabetes se presenta en la 3 y 4 década de la vida del paciente 40 años y también en adultos mayores.

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La clasificación se basa en la velocidad a la que deja de fabricar insulina, en la diabetes tipo 1 ya no hay insulina, en la tipo 2 con el paso del tiempo se deja de producir insulina. Min Este tipo de paciente tiene exceso de insulina, klf 10 diabetes super el cuerpo ignora esta insulina, debido que existe gran cantidad de insulina, debido que baja o tumba los receptores. También existe otro tipo de diabetes tipo 1.

Se trata de una alteración heterogénea que implica 8 genes, donde la mayoría de ellos son factores de transcripción que intervienen klf 10 diabetes super el desarrollo neuronal, pero los genes Mody 2 y mody 3 son los mas comunes.

Pero si su pareja si presenta la enfermedad aumentara en un 75 o a sus hijos dependiendo si es homocigoto o heterocigoto. Tipo 1 es una mutacion en el factor nuclear 4x del hepatocito HNF — axesta mutacion esta localizado en el coromosma 20q y se expresa principalmente en una disfuncion de la celula B progresiva check this out severa.

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Y se caracteriza por una disfunción progresiva y severa de la célula B. Los fragmentos mutados si se consiguen a posteriori para conocer exactamente el lugar de mutación que provoca el fonético observado algunos de estos son el desarrollo de células beta, el recambio proteico o ser la causante de la diabetes tipo mody por klf 10 diabetes super regulación de alguno de sus factores entre ellos mismos.

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